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Phleomycin (20mg/ml) 腐草霉素(20 mg/ml)

貨號(hào) M0339 售價(jià)(元) 4320
規(guī)格 20mg CAS號(hào) 11006-33-0
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品信息

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

價(jià)格

M0336

Phleomycin (20mg/ml) 腐草霉素(20 mg/ml

20mg

921

M0339

Phleomycin (20mg/ml) 腐草霉素(20 mg/ml

100mg

4320

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Phleomycin是由Streptomyces verticillus(輪枝鏈霉菌)的突變株產(chǎn)生的一種糖肽抗生素,屬于博來(lái)霉素(bleomycin)家族。Phleomycin可結(jié)合并插入DNA,破壞其雙螺旋結(jié)構(gòu)的完整性,Phleomycin在細(xì)菌、真菌、酵母、植物細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞上均能發(fā)揮活性,用于篩選攜帶Sh ble基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞,可用于對(duì)Zeocin不敏感的細(xì)胞。

Warbio公司以20mg/ml的無(wú)菌溶液形式提供,可直接用于細(xì)胞培養(yǎng),在0.1-50μg/ml濃度范圍內(nèi),腐草霉素可以抑制大多數(shù)好氧細(xì)胞的生長(zhǎng)。

產(chǎn)品性質(zhì)

分子式(Formula):C55H85O21N20S2Cu-HCl

Cas: 11006-33-0

分子量(Molecular Weight):1525

外觀(Appearance):藍(lán)色粉末或藍(lán)白色混合粉末

純度(Purity):>90%(HLPC)

濃度:溶于水(20 mg/ml)和甲醇

應(yīng)用參考濃度:

1大腸桿菌

攜帶bleomycin抗性基因如Sh bleTn5的質(zhì)粒,一旦轉(zhuǎn)化進(jìn)入大腸桿菌受體菌如HB101 DH5a, MC1061,賦予其腐草霉素抗性。

腐草霉素抗性的轉(zhuǎn)化子可以在添加5 μg/ml Phleomycin的低鹽LB瓊脂培養(yǎng)基(Yeast extract 5g/L, Tryptone 10g/L, NaCl 5g/L, Agar 15 g/L, pH 7.5)中進(jìn)行篩選。加有腐草霉素的平板可于4℃穩(wěn)定保存1個(gè)月。

2酵母菌

釀酒酵母的腐草霉素抗性轉(zhuǎn)化子可在添加10 μg/ml PhleomycinYEPD培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選。

操作步驟:按常規(guī)方法進(jìn)行酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化,一旦DNA進(jìn)入細(xì)胞后,用YEPD培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞并置于搖床上培養(yǎng)6h或過(guò)夜,使其抗性性狀得以表達(dá)。之后將細(xì)胞冰浴1h并涂布培養(yǎng)在添加10 μg/ml PhleomycinYEPDpH 7.0)固體培養(yǎng)基上。

3真菌

根據(jù)轉(zhuǎn)化子對(duì)Phleomycin 的敏感性不同,在添加有10-50 μg/ml腐草霉素的再生培養(yǎng)基內(nèi)進(jìn)行篩選。先將細(xì)胞在4℃孵育過(guò)夜然后置于生長(zhǎng)溫度培養(yǎng),可提高其對(duì)抗生素的敏感性。

4 植物細(xì)胞

根據(jù)植物類(lèi)型不同,選擇5-25 μg/ml Phleomycin進(jìn)行轉(zhuǎn)化子篩選。

5 哺乳動(dòng)物細(xì)胞

5-50 μg/ml Phleomycin,推薦先通過(guò)建立滅殺曲線來(lái)確定濃度。與G418做比較,可能需要更長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)殺死細(xì)胞或者使細(xì)胞從平板上脫落,尤其當(dāng)細(xì)胞處于高密度的情況。

依細(xì)胞系不同,通常需要5~21天來(lái)挑選具腐草霉素抗性的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞。

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

儲(chǔ)存

M0943

潮霉素B Hyaromycin B 

1g

650

M0942

潮霉素B50 mg/mlHygromycin B (50 mg/ml)

1g

680

M9337

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml

5×10mg

2450

M1113

Zeocin博萊霉素(100 mg/ml

8×125mg

2200

M2150

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素鹽酸鹽

25mg

678

CB937

Vancomycin Hydrochloride 鹽酸萬(wàn)古霉素

1g

1868

注意事項(xiàng): 

1)腐草霉素對(duì)濃酸較為敏感,但可短時(shí)間暴露于稀酸中。使用前將本品回溫至室溫,并輕輕混勻。

2)腐草霉素有毒,避免直接接觸皮膚,不可吞服。酸性或堿性pH,或次磷酸鈉中會(huì)即刻失效。

3)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

【注1】細(xì)胞對(duì)腐草霉素的敏感性受pH值影響,如pH值越高,敏感性越高;另外,對(duì)于高滲透壓培養(yǎng)基如原生質(zhì)體再生用的培養(yǎng)基,腐草霉素的活性會(huì)明顯降低2-3倍。因此也可能通過(guò)使用低鹽培養(yǎng)基來(lái)降低腐草霉素使用量。

【注2】使用前需將低溫存放的腐草霉素置于室溫回溫,之后低速充分混勻

運(yùn)輸與保存

4°C或-20°C保存1年,避免反復(fù)凍融。



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