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CRISPR雙酶切檢測試紙條(變色龍)

貨號 JY0308 售價(元) 2600
規(guī)格 50T CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品信息

本產(chǎn)品采用層析式雙抗體夾心法檢測Cas12Cas13酶切割產(chǎn)物。當(dāng)靶基因經(jīng)過LAMP,RAA/RPAPCR擴(kuò)增后,使用Cas12Cas13酶同時對擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行切割,Cas12酶對應(yīng)的DNA信號探針ACas12切割),與Cas13酶對應(yīng)的RNA信號探針BCas13切割)進(jìn)行如下修飾,即可使用本產(chǎn)品進(jìn)行切割產(chǎn)物的檢測:

1)? 探針A一端修飾有生物素(Biotin),另一端修飾有異硫氰酸熒光素(FITC)或6-羧基熒光素(6-FAM),探針B一端修飾有生物素(Biotin),另一端修飾有地高辛(Dig);

2)? 或,探針A一端修飾有生物素(Biotin),另一端修飾有地高辛(Dig),探針B一端修飾有生物素(Biotin),另一端修飾有異硫氰酸熒光素(FITC)或6-羧基熒光素(6-FAM)。

預(yù)期用途:

Cas12Cas13雙酶切后的產(chǎn)物檢測。

包裝規(guī)格/貨號:

包裝規(guī)格:50/桶,鋁箔袋防潮包裝。

1. 單靶標(biāo)HybriDetect側(cè)向?qū)游鲈嚰垪l(彩虹型)結(jié)構(gòu)示意圖

儲存條件及有效期:

儲存條件:存放于避光干燥處,儲存溫度4~30。

有效期:12個月。

操作步驟:

1.?根據(jù)檢測樣品數(shù)量取出相應(yīng)數(shù)量的試紙條,并在吸收墊(圖1)上做好標(biāo)記。每根試紙條只能用于單次,DNA探針和RNA探針同時切割的產(chǎn)物檢測。酶切產(chǎn)物體積為50~100μL時,可直接在200μL PCR反應(yīng)管中檢測核酸產(chǎn)物,產(chǎn)物體積不足50μL時,需在PCR管內(nèi)加超純水補(bǔ)足體積至50μL,吸打混勻后,才能進(jìn)行檢測。

2.?LAMP,RAA/RPA,PCR擴(kuò)增產(chǎn)物加入CRISPR體系酶切反應(yīng)結(jié)束后,打開PCR反應(yīng)管,將試紙條結(jié)合墊端(箭頭端)插入PCR反應(yīng)管(圖1),液面不得超過結(jié)合墊最上端,待判讀區(qū)全部浸潤(約需12min,外界環(huán)境溫度較低時,如冬季,會降低吸水速度,判讀區(qū)浸潤時間將會延長),待檢測線(T線)顯色后,可以將試紙條拿出。根據(jù)試紙條顯色情況直接讀取檢測結(jié)果。

3.??質(zhì)控線(C線)顯色后10min內(nèi)觀察結(jié)果,10min后判讀無效。

4.????記錄檢測結(jié)果,將試紙條密封丟棄在安全處。

結(jié)果判讀:


?

2. CRISPR雙酶切檢測試紙條結(jié)果判讀示意

顏色說明:本產(chǎn)品為變色雙矯正顯色試紙條,其中C線為紫色,T1為紅色,T2為藍(lán)色。在探針A和探針B等摩爾濃度混合,且終濃度500nM時,帶有FAM標(biāo)記的探針酶切后,T1顯色為紅色,C線逐漸變?yōu)樗{(lán)色;帶有Dig標(biāo)記的探針酶切后,T2顯色為藍(lán)色,C線逐漸變?yōu)榧t色,從而達(dá)到互相矯正的目的。

1.? ?陽性(+):

試紙條質(zhì)控線(C線)和2條檢測線(T線)均出現(xiàn)條帶,其中T1為紅色,T2為藍(lán)色,C線為紫色;試紙條質(zhì)控線(C線)不顯色,T1為紅色,T2為藍(lán)色時,說明Cas12Cas13可進(jìn)行有效酶切,并激活報告基團(tuán)顯色,相應(yīng)的靶基因均可判定為陽性。

試紙條質(zhì)控線(C線)和其中1條檢測線(T線)出現(xiàn)條帶,其中:T1為紅色,C線為藍(lán)色時,說明FAM標(biāo)記信號分子的相應(yīng)靶基因可判定為陽性;T2為藍(lán)色,C線為紅色時,說明Dig標(biāo)記分子的相應(yīng)的靶基因可判定為陽性。

2.??陰性(-):

試紙條質(zhì)控線(C線)為紫色色條帶,檢測線(T線)不顯色,判定為陰性結(jié)果。該結(jié)果表明Cas12Cas13均不能切割報告分子,未能激活報告基團(tuán)顯色。

3.??無效:

試紙條質(zhì)控線(C線)和2檢測線(T線)均未出現(xiàn)條帶,提示所用的試紙條或擴(kuò)增試劑可能已經(jīng)損壞、失效或操作有誤。此時,應(yīng)仔細(xì)閱讀說明書,重新擴(kuò)增和檢測。如果問題仍然存在,應(yīng)立即停止使用同一批號的產(chǎn)品,并與當(dāng)?shù)毓?yīng)商聯(lián)系。

注意事項及安全提示:

1.?本產(chǎn)品應(yīng)結(jié)合探針使用,如探針合成純度不足,探針含游離的Biotin或者游離的FITC時,會導(dǎo)致以超純水為陰性對照的切割產(chǎn)物T線呈現(xiàn)紅色,即陰性對照呈現(xiàn)假陽性結(jié)果。

2.?本產(chǎn)品可用于探針合成質(zhì)量的檢測。調(diào)整空白陰性對照中探針的使用濃度至400 nM,并進(jìn)行切割反應(yīng)。當(dāng)試紙條結(jié)合墊端浸入Cas12/Cas13切割產(chǎn)物后的5~7 min內(nèi),試紙條T線顯紅色,即說明探針純度難以滿足實(shí)驗(yàn)要求,會因探針純度不足導(dǎo)致假陽性結(jié)果。建議更換探針合成供應(yīng)商,并重新合成探針。

3.?本產(chǎn)品僅供科研使用。使用前請仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格按照說明書操作。違反或者未按說明書進(jìn)行操作可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。

4.?產(chǎn)品應(yīng)依照說明書要求,儲存于合適的環(huán)境和溫度下,并在有效期內(nèi)使用。儲存不當(dāng)或產(chǎn)品過期可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。打開包裝后請盡快使用試紙條,以免因試紙條受潮影響試驗(yàn)結(jié)果。檢測環(huán)境光線不足,操作者色弱等因素均可能導(dǎo)致錯誤結(jié)果。

5.?使用完畢后,應(yīng)盡快將紙條裝進(jìn)密封袋,妥善處理。本產(chǎn)品為一次性使用產(chǎn)品,僅限科研,請勿重復(fù)使用。

相關(guān)產(chǎn)品

貨號

產(chǎn)品

規(guī)格

JY0209

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50T

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WLRB5001

RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒(液體基礎(chǔ)型)

100T

WLRN5002

RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒(液體膠體金型)

100T

WLRE5003

RNA恒溫快速擴(kuò)增試劑盒(液體熒光型)

100T