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快閃核酸釋放劑
貨號 | BT6008 | 售價(元) | 1500 |
規(guī)格 | 1ml | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
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產(chǎn)品信息
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
價格 |
BT6008 |
快閃核酸釋放劑 |
1ml |
1500 |
產(chǎn)品簡介
本釋放劑可用于全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等動物樣品,或根、莖、葉、花、種子等植物樣品的核酸(DNA、RNA均可)提取、富集、純化等步驟,核酸釋放劑處理后的裂解產(chǎn)物可直接用于Marathon DNA Polymerase(BT0016)的PCR擴增,RPA核酸擴增試劑盒,RT RPA核酸擴增試劑盒和RPA核酸擴增試劑盒(試紙條法)的等溫擴增。無須添加溶菌酶、溶葡萄球菌素或蛋白酶K等酶制劑,也無須使用酚、氯仿等有害化學試劑。一步、單管操作,方便快捷,操作時間不足1 min。靈敏度高,重現(xiàn)性好。用本試劑盒處理后,取1~15μL裂解產(chǎn)物上清液做模板進行PCR,可穩(wěn)定擴增添加量為10的1次方拷貝的靶基因。可用于食品安全、疾控、突發(fā)傳染病、動物疫情、分子診斷、精準用藥基因檢測前的樣品處理。
步驟:
1.動物樣本
全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等樣品經(jīng)適當處理后,按快閃核酸釋放劑(BT0068):液體樣品=1:7的比例與待檢樣本混合即可。當樣品濃度較低時,建議裂解體系≥ 50 μL,即可確保證裂解產(chǎn)物內(nèi)含有可檢出的足量核酸樣品。
混合后的溶液用槍頭或一次性塑料吸管充分吸打20次后,吸取上清液至一干凈的離心管內(nèi),待檢。
PCR、RPA或RT RPA擴增時,裂解產(chǎn)物上清液可加至反應(yīng)體系允許的最大添加量。
2.植物樣本
待檢材料經(jīng)簡單沖洗后,剪成2~5mm見方的小塊或小段,加入100μL的快閃核酸釋放劑(BT6008),并以槍頭碾壓待檢材料數(shù)次,對樣本進行簡單的破碎處理后,用槍頭或一次性塑料吸管充分吸打20次后,吸取上清液至一干凈的離心管內(nèi),待檢。
PCR、RPA或RT RPA擴增時,可吸取1μL的裂解產(chǎn)物上清液進行檢測即可。
擴增體系中裂解產(chǎn)物的添加量:如出現(xiàn)待檢樣品、陽性對照及陰性對照樣品裂解后的檢測結(jié)果與實際不符的情況,可按裂解產(chǎn)物添加體積±2μL的梯度設(shè)置平行試驗,確定同一擴增體系內(nèi)裂解產(chǎn)物體積不同添加量對樣品、陽性對照及陰性對照的檢測情況是否有影響,在確保陽性對照檢測結(jié)果為陽性,陰性對照檢測結(jié)果為陰性的情況下,選取最大的裂解產(chǎn)物添加量。因快閃核酸釋放劑具有抑制非特異性擴增的作用,在陰性對照均檢測為陰性,陽性對照均檢測為陽性的情況下,可按擴增體系的最大添加樣品添加體積添加裂解產(chǎn)物。
注意事項:
1.本釋放劑用于全血、血清、血漿、尿液、唾液、口腔拭子、鼻咽拭子、細胞懸液等樣品的核酸提取時,應(yīng)盡量在樣本采集后立刻完成樣本處理。如條件不允許,應(yīng)以冷藏或冷凍方式運輸樣本。
2.如用于傳染性疾病樣本檢測時,操作時需注意安全防護,應(yīng)在規(guī)定的實驗場所進行,穿戴防護衣物、一次性手套和口罩等;所有直接接觸過病原物樣品的物品應(yīng)消毒后再丟棄或再次使用。
3.本釋放劑目標為動物液體樣本的快速粗處理,處理物可用于Marathon DNA Polymerase(BT0016)的PCR擴增,RPA核酸擴增試劑盒,RT RPA核酸擴增試劑盒和RPA核酸擴增試劑盒(試紙條法)的等溫擴增。處理物不可用于紫外分光光度定量等對核酸純度要求較高的實驗。
4.快閃核酸釋放劑(BT6008)裂解樣品時,快閃核酸釋放劑(BT6008)為8×溶液,裂解體系為快閃核酸釋放劑(BT6008):液體樣本=1:7,該比例經(jīng)反復(fù)優(yōu)化,切勿隨意調(diào)整!
5. PCR、RPA或RT RPA擴增時,處理物上清液可加至反應(yīng)體系允許的最大添加量。擴增模板為DNA時,-20℃保存的處理液上清液可于24 h內(nèi)多次、重復(fù)使用。PCR或RPA反應(yīng)的成功,與引物設(shè)計、循環(huán)參數(shù)或擴增時間設(shè)置密切相關(guān)。如使用本試劑盒處理樣品后,擴增失敗,請確認用其它方法提取核酸的PCR或RPA反應(yīng)是否成功。
6.本試劑僅用于科研用途,請勿用于臨床、食品等。