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Collagen, Type I, from Rat Tail鼠尾I型膠原蛋白

貨號(hào) J1238 售價(jià)(元) 2250
規(guī)格 10ml (50mg) CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品信息

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價(jià)格

J1216

Collagen, Type I,  from Rat Tail 鼠尾I型膠原蛋白

2ml (10mg)

600

J1238

Collagen, Type I,  from Rat Tail 鼠尾I型膠原蛋白

10ml (50mg)

2250

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

        沃博生物的鼠尾I型膠原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在無(wú)菌下制備,純度達(dá)到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于細(xì)胞培養(yǎng)皿的包被,特別適合普通細(xì)胞培養(yǎng)器皿不易貼壁細(xì)胞的培養(yǎng);也可用于制備三維膠原凝膠,使細(xì)胞在模擬的三維環(huán)境中生長(zhǎng)。

產(chǎn)品性質(zhì)

中文別名:鼠尾膠原蛋白Ⅰ型

英文別名:Rat tail tendon collagen type

外觀(Appearance):白色粉末

溶解性(Solubility):溶解于0.006mol/L乙酸 5mg/ml

優(yōu)勢(shì)特點(diǎn)

無(wú)塵車間內(nèi)生產(chǎn),保證潔凈度

可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿(單分子層包被)

也可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠用于細(xì)胞的三維空間培養(yǎng)

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試(包括三維膠內(nèi)的細(xì)胞培養(yǎng))

電泳結(jié)果和 Sigma 的同類產(chǎn)品無(wú)顯著區(qū)別

產(chǎn)品為無(wú)菌的溶液,省去從干粉配制的麻煩

圖示案例

圖1:沃博生物的鼠尾膠原蛋白包被的

培養(yǎng)皿中生長(zhǎng)的 PC-12 細(xì)胞

圖2:沃博生物的鼠尾膠原蛋白三維膠中

生長(zhǎng)的 NIH-3T3 細(xì)胞(接種后 5天)


圖3:Sigma鼠尾膠原蛋白(貨號(hào): C7661)

SDS-PAGE 電泳對(duì)比。

A: Sigma B:warbio

實(shí)驗(yàn)步驟參考

1、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被 推薦濃度: 1-5ug/cm2

以包被濃度為 2 ug/cm2 為例

用無(wú)菌0.006mol/L(0.36g/L) 乙酸將膠原蛋白稀釋到0.012mg/ml。按表 ()體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中

確保膠原蛋白溶液鋪滿器皿的表面,開蓋在超凈臺(tái)上過(guò)夜晾干。 也可以在室溫放置 1小時(shí)后,用PBS3-4次后直接使用。

按表 ()體積加到相應(yīng)的培養(yǎng)器皿中:

培養(yǎng)皿類型

表面積(cm2 ,每孔或每皿)

加入 0.012mg/ml 膠原的體積 ( ul )

96孔細(xì)胞培養(yǎng)板

0.3

50

24孔細(xì)胞培養(yǎng)板

1.9

300

12孔細(xì)胞培養(yǎng)板

3.8

600

6孔細(xì)胞培養(yǎng)板

9.5

1580

35mm細(xì)胞培養(yǎng)皿

8

1330

60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿

21

3500

100mm細(xì)胞培養(yǎng)皿

55

9170

包被好的器皿在 4-25℃至少可保存3個(gè)月以上的時(shí)間。

2、三維膠原的制備

沃博生物的鼠尾膠原蛋白I型在濃度1mg/ml以上,pH 7左右時(shí)可形成具有一定強(qiáng)度三維膠,建議成膠濃度1-2mg/ml。沃博膠原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中,在成膠過(guò)程中需要加入0.06X 體積的 0.1mol/L NaOH 來(lái)中和。

需要的溶液 ( 均需要 無(wú)菌 、 預(yù)冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚紅用于 pH 指示 ) 10x 培養(yǎng)液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 雙蒸水

A.不含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):將200ul沃博生物鼠尾膠原蛋白I(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中,加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入100ul 10xPBS10x培養(yǎng)液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后pH7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。將培養(yǎng)器皿在室溫(25度左右)下放置20分鐘待膠凝固后,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。如果配制中使用的是10xPBS,使用前需要加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。

B.含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,并放置于冰浴中。將200ul沃博生物鼠尾膠原蛋白I (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中(如果反過(guò)來(lái)把12ul 0.1mol/L NaOH加到膠原溶液中,會(huì)由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23ul 10xPBS10x培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒(méi)有加酚紅,初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

注:鼠尾膠原蛋白I型在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠,在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。

1 、 Birkedal-Hansen, H. 1987. Catabolism and turnover of collagens: Collagenases. Methods Enzymol. 144 : 140-171.

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價(jià)格

J8640

BSA, Standard Grade 牛血清白蛋白(標(biāo)準(zhǔn)級(jí)別)

25g

280

M9403

BSA, Fatty Acid  Free 牛血清白蛋白(無(wú)脂肪酸)

25g

825

M7404

BSA, Protease Free牛血清白蛋白(無(wú)蛋白酶)

100g

2090

M4205

BSA, DNase, Protease, IgG Free 牛血清白蛋白(無(wú)DNase、蛋白酶、IgG

25g

798

M9603

BSA, Fatty Acid  Free 牛血清白蛋白(無(wú)脂肪酸)

100g

2310

M3206

BSA, Diagnostic Grade 牛血清白蛋白(診斷級(jí)別)

25g

748

M2407

BSA, Acetylated 乙酰化牛血清白蛋白

1ml (20mg)

1490

J1641

Dispase II 分散酶

1g

2400

注意事項(xiàng)

1、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

2、鼠尾膠原蛋白I型在室溫下pH中性時(shí)可迅速成膠,在操作過(guò)程中要盡量保持低溫。

3 、整個(gè)操作請(qǐng)?jiān)跓o(wú)菌環(huán)境下無(wú)菌操作,避免污染以影響細(xì)胞生長(zhǎng)。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。4℃保存,有效期1年。不可凍存。


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