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產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品簡介：

在細(xì)胞體外培養(yǎng)工作中，為了達(dá)到長期保存細(xì)胞的生物活性的目的，須將細(xì)胞進(jìn)行冷凍保存，并在實(shí)驗(yàn)需要的時(shí)候?qū)⑵渲匦聫?fù)蘇和培養(yǎng)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用添加適量保護(hù)劑使細(xì)胞緩慢降溫至指定溫度范圍，從而到達(dá)保護(hù)細(xì)胞的目的。

 沃博生物無血清細(xì)胞凍存液是面向數(shù)百種細(xì)胞研發(fā)出的專用凍存液產(chǎn)品。該產(chǎn)品添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑，可延緩細(xì)胞在凍存過程中的沉降速率，防止細(xì)胞互相擠壓，影響細(xì)胞凍存效果。另外，添加了細(xì)胞膜保護(hù)劑、滲透性細(xì)胞膜內(nèi)保護(hù)劑、非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑等多種冷凍保護(hù)劑，這些成分在溶液中同水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，能大大降低細(xì)胞在凍存過程中冰晶對于細(xì)胞的損傷，有效提高細(xì)胞復(fù)蘇存活率。該產(chǎn)品配方成分明確，不含血清、不含動(dòng)物源性蛋白，可減少各類細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全；不僅適用于常規(guī)細(xì)胞系、原代細(xì)胞，同時(shí)亦適合于無血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞。

與傳統(tǒng)凍存液相比，無需繁瑣費(fèi)時(shí)的程序凍存步驟或價(jià)格高昂的程序降溫儀，可直接重懸細(xì)胞后置于-80℃，次日轉(zhuǎn)移到液氮完成整個(gè)凍存過程，節(jié)省大量的時(shí)間和精力。

產(chǎn)品優(yōu)勢：

省時(shí)省力——直接存放于-80℃冰箱凍存，無需程序降溫

安全性高——無血清，化學(xué)成分明確

高 品 質(zhì)——細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上

使用方便——2-8℃即可穩(wěn)定保存，無需冷凍，即取即用

化學(xué)成分明確——沒有添加任何外源蛋白，減少細(xì)胞污染機(jī)會，同時(shí)減少外源蛋白對細(xì)胞正常生長和分化的影響

操作步驟

(一)細(xì)胞凍存

1、選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞（90%左右），并保證在凍存前24h 內(nèi)換液一次，收集細(xì)胞，并將細(xì)胞制備成單細(xì)胞懸液（貼壁細(xì)胞可能需要用胰酶消化），計(jì)數(shù)；

2、將細(xì)胞懸液1000r/min 離心5min，棄上清；

3、向細(xì)胞沉淀物中加入細(xì)胞凍存液，輕輕吹打，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞密度達(dá)到5×10?～1×10?個(gè)/mL；

4、將上述細(xì)胞懸液按0.5ml～1.0ml 的量，分裝于無菌細(xì)胞凍存管內(nèi)，擰緊管蓋，并做好標(biāo)記；

5、將凍存管直接置于-80℃冰箱中，24 h后移入液氮長期保存。

(二)細(xì)胞復(fù)蘇

1、從液氮罐中取出凍存的細(xì)胞，立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(操作時(shí)切勿使水浸沒凍存管口，以免造成細(xì)胞污染)；

2、待細(xì)胞凍存管中凍存液完全融化后，立即逐滴加入少量細(xì)胞完全培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞進(jìn)行混合，再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有8～10mL該細(xì)胞完全培養(yǎng)基的試管中，輕輕混合均勻；1000r/min離心5min，棄上清；

3、加入1～2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，按照合適的接種密度將細(xì)胞接種到細(xì)胞培養(yǎng)容器中，加入適量的已預(yù)熱的新鮮的細(xì)胞完全培養(yǎng)基；

4、輕輕搖晃培養(yǎng)器皿，使細(xì)胞分布均勻，靜置于37℃、飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件

1、置于2～8℃避光保存，有效期為1年；

2、本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用，超過保質(zhì)期，必須放棄使用；

3、為確保產(chǎn)品質(zhì)量，請避免反復(fù)凍融相關(guān)產(chǎn)品。

1、凍存細(xì)胞分裝至凍存管后，應(yīng)減少在室溫/4℃存放時(shí)間，盡快移入到-80℃超低溫冰箱；

2、對于原代胚胎干細(xì)胞/iPS細(xì)胞/其它珍貴細(xì)胞樣本等凍存時(shí)，我們建議您在使用前，事先對所凍存的細(xì)胞進(jìn)行至少為期1周的細(xì)胞凍存測試實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)沒問題后再進(jìn)行正式凍存；

3、本產(chǎn)品經(jīng)3次0.22μm過濾除菌，使用本產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意無菌操作，避免污染；

4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作；

5、 本產(chǎn)品僅限科研使用。