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MTT Cell Proliferation Assay Kit (MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 )

貨號 S4025 售價(元) 616
規(guī)格 1000T CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

價格(元)

S4015

MTT Cell Proliferation Assay Kit MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 )

500T

352

S4025

MTT Cell Proliferation Assay Kit MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 )

1000T

616

產(chǎn)品簡介:

MTT 比色法是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。 MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測。MTT 檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為水不溶性的藍(lán)紫色 Formazan 并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無此功能。在特定溶劑存在的情況下,可以被完全溶解。然后通過酶標(biāo)儀可以測定 570nm 波長附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高;細(xì)胞毒性越大,則吸光度越低。

warbio MTT 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒采用了特有的 Formazan solvent,使檢測本底低,靈敏度高,線性范圍寬.。


試劑盒組分 

組分 A: MTT Solution(5mg/ml)  5 mL      -20℃,避光

組分 B: Formazan Solvent       60 mL     RT


保存條件:

    -20℃,避光 條件下保存,保質(zhì)期 12 個月。

操作步驟(僅供參考)

1、 細(xì)胞用含血清的培養(yǎng)液培養(yǎng)至對數(shù)生長期,常規(guī)胰蛋白酶消化液消化細(xì)胞(懸浮細(xì)胞無需消化)

2、 低速離心,收集細(xì)胞沉淀。

3、 用培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀,制備成單細(xì)胞懸液,并計數(shù)。

4、 細(xì)胞接種于 96 孔培養(yǎng)板,一般接種密度為 300010000 個細(xì)胞/孔。通常細(xì)胞增殖實驗每孔加 3000 個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入 6000 個細(xì)胞。具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定。

5、 37℃ 5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)或按照實驗具體需要進(jìn)行培養(yǎng),一般培養(yǎng) 624h

6、 按照實驗具體要求,給予 020μl 干預(yù)藥物處理,37℃ 5%CO2繼續(xù)培養(yǎng)至合適時間。

7、 棄培養(yǎng)液,每孔加入 10μl MTT solution 100μl 新鮮培養(yǎng)液,在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育 4h。

8、 棄培養(yǎng)液,每孔加入 110μl Formazan solvent,置搖床上低速振蕩 10 min,使結(jié)晶物充分溶解。如果紫色結(jié)晶較小或較少,溶解的時間會短一些。如果紫色結(jié)晶較大或較多,溶解的時間會長一些。

9、 在酶聯(lián)免疫檢測儀 570nm 測定各孔吸光度。

      注意事項

MTT solution 盡量減少反復(fù)凍融的次數(shù),當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時,請勿使用。

由于使用 96 孔板進(jìn)行檢測,如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長,應(yīng)注意蒸發(fā)問題。

 MTT solution 在低溫情況下會凝固,置于室溫或 2025℃水浴至全部融解后使用。

Formazan solvent 可以-20℃儲存,當(dāng)產(chǎn)生沉淀或凝固時可以 37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用。

觀察 formazan 是否完全溶解,亦可以借助光學(xué)顯微鏡觀察。

培養(yǎng)細(xì)胞時盡量細(xì)菌避免污染。

應(yīng)注意設(shè)立 OD 調(diào)零孔和對照。

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。。

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號

名稱

規(guī)格

價格(元)

L3041

MTT 噻唑蘭

1g

308

S9022

Alamar Blue 阿爾瑪藍(lán)

5ml (500T)

308

C9512

Annexin V-FITC/PI雙染法細(xì)胞凋亡檢測試劑盒

50T

987.8

J707S

JC-10 線粒體膜電位熒光探針

1mg

845

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