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超氧陰離子清除能力檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)

貨號 SH0061 售價(元) 600
規(guī)格 50T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0061

超氧陰離子清除能力檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)

50管/48樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

超氧陰離子自由基作為生物體代謝過程中產(chǎn)生的一種自由基,可攻擊生物大分子,如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸和聚不飽和脂肪酸等,使其交鏈或者斷裂,引起細胞結(jié)構(gòu)和功能的破壞,與機體衰老和病變有很密切的關系,清除超氧陰離子自由基的研究已經(jīng)得到了廣泛的關注。

測定原理:

AP-TEMED系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子,鹽酸羥胺反應生成NO2-,NO2對氨基苯磺酸和α-萘胺的作用生成紅色的偶氮化合物,530nm有特征吸收峰,樣品對超氧陰離子的清除能力與530nm的吸光值呈負相關。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0061-50T/48S

Storage

提取液:液體

50ml

4℃

試劑一:液體

3ml

4℃避光

試劑二:粉劑

一瓶

4℃避光

試劑液體

15ml

4℃

試劑液體

15ml

4℃避光

試劑液體

15ml

4℃避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計、1 ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

樣品處理

1. 組織:按照質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1ml提取液)加入提取液,冰浴勻漿后于4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。

2. 細胞:按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~10001的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,10000g離心10min,取上清置于冰上待測。

3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。

4. 粉劑藥物可配制成相同濃度,比如1mg/ml

測定操作表

 

對照管

測定管

試劑一(μl

40

40

試劑二(μl

160

160

H2Oμl

100

 

充分混勻,25℃反應1min

樣品(μl

 

100

試劑三(μl

200

200

充分混勻,37℃反應30min

試劑四(μl

200

200

試劑五(μl

200

200

充分混勻,37℃顯色20min,于1ml玻璃比色皿,在530nm處測定對照管和測定管的吸光值,分別記為A對照管和A測定管。

注意:對照管只需測定一次。

  

計算公式

超氧陰離子清除率 I%=

注意事項

1. 試劑一4℃可保存2個月,配制好的試劑二4℃可保存一周,建議實驗前配制,并盡快使用。

2. 樣品處理完后立即進行測定,或者低溫保存不超過24小時。

 

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