當(dāng)前位置： 首頁 - 產(chǎn)品目錄 - 生化試劑盒
可溶性淀粉合成酶SSS檢測試劑盒（分光光度法 50T/48S）
| 貨號 | SH0276 | 售價(jià)（元） | 4080 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
|
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
|
SH0276 |
可溶性淀粉合成酶SSS檢測試劑盒（分光光度法 50T/48S） |
50T/48S |
|
SH0277 |
可溶性淀粉合成酶SSS檢測試劑盒（分光光度 25T/24S） |
25T/24S |
測定意義：
SSS（EC 2.4.1.21）通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中，催化淀粉鏈延長，主要負(fù)責(zé)支鏈淀粉的合成。
測定原理：
SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng)，將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上，同時(shí)生成ADP，在反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH，NADPH生成量與前一步反應(yīng)中ADP生成量呈正比，340nm下測定NADPH增加量即可計(jì)算SSS活性。
組成：
|
產(chǎn)品名稱 |
SH0277-25T/24S |
SH0276-50T/48S |
Storage |
|
提取液：液體 |
30ml |
60ml |
4℃ |
|
試劑一：液體 |
25ml |
50ml |
4℃ |
|
試劑二：粉劑 |
1瓶 |
1瓶 |
4℃ |
|
試劑三：粉劑 |
1瓶 |
1瓶 |
4℃ |
|
試劑四：粉劑 |
1瓶 |
1瓶 |
4℃ |
|
試劑五：液體 |
1瓶 |
1瓶 |
-20℃ |
|
試劑六：粉劑 |
1瓶 |
1瓶 |
-20℃ |
|
說明書 |
1份 |
||
SH0277-25T/24S試劑二臨用前加入7ml試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0277-25T/24S試劑三臨用前加入4ml試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0277-25T/24S試劑四臨用前加入9ml試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0277-25T/24S試劑五臨用前加入0.5ml蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0277-25T/24S試劑六臨用前加入0.5ml蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0276-50T/48S試劑二臨用前加入14ml試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0276-50T/48S試劑三臨用前加入8ml試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0276-50T/48S試劑四臨用前加入17ml試劑一充分混勻備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0276-50T/48S試劑五臨用前加入1ml蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
SH0276-50T/48S試劑六臨用前加入1ml蒸餾水，充分溶解備用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
自備儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺式離心機(jī)、移液器、1 ml石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
粗酶液制備：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、在EP管中按順序加入下列試劑
|
試劑名稱（μl） |
測定管 |
|
樣本 |
150 |
|
試劑二 |
270 |
混勻，30℃保溫20 min，置沸水浴中1 min（蓋緊，防止水分散失），冰浴冷卻
|
試劑三 |
150 |
混勻，30℃保溫30 min，置沸水浴中1 min（蓋緊，防止水分散失），冰浴冷卻，10000g 4℃離心10min，取上清液（如果一次性測定樣本較多，可將試劑四、五和六按比例配成混合液）
|
上清液 |
450 |
|
試劑四 |
300 |
|
試劑五 |
15 |
|
試劑六 |
15 |
混勻后立即340 nm波長下記錄初始吸光度A1和 2min后的吸光度A2，計(jì)算ΔA=A2-A1。
注意：試劑二如有沉淀，加入之前要使之充分溶解混勻。
SSS活性計(jì)算：
1、按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
GBSS（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(Cpr×V樣) ÷T×稀釋倍數(shù)
=529×ΔA÷Cpr
此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。
2、按照樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
GBSS活性（nmol/min /g 鮮重）=[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷（V樣÷V樣總×W）÷T×稀釋倍數(shù)
=529×ΔA÷W
V 反總：反應(yīng)體系總體積，7.8×10-4 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.15 ml；V樣總：加入提取液體積，1 ml；T：反應(yīng)時(shí)間，2 min；稀釋倍數(shù)：1.9；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量。