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植物蔗糖酶檢測試劑盒(分光光度法 50T/24S)

貨號 SH0304 售價(元) 660
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0304

植物蔗糖酶檢測試劑盒(分光光度法 50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的關(guān)鍵酶之一,能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收。

測定原理:

本試劑盒采用3.5-二硝基水楊酸法測定蔗糖酶催化產(chǎn)生的還原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5-二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物,在一定范圍內(nèi)還原糖的量和反應(yīng)液的顏色深度成正比。此法操作簡便、迅速、雜質(zhì)干擾較小。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0304-50T/24S

Storage

提取液:液體

60ml

4℃

試劑一:液體

2.5ml

4℃

試劑二:粉劑

1

4℃

試劑三:液體

5ml

常溫

、說明書

一份

試劑二:粉劑×1支 ,4℃保存,用時加入1.5ml蒸餾水充分溶解;用不完的試劑4℃保存;

自備儀器和用品:

可見分光光度計、沸水浴、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品測定的準(zhǔn)備: 

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

加樣表測定步驟:

試劑名稱(μl

對照管

測定管

試劑一

50

50

蒸餾水

50

 

樣本

100

100

試劑二

 

50

置于25℃準(zhǔn)確水浴10min

試劑三

100

100

混勻, 95℃水浴5min左右(蓋緊,防止水分散失),冷卻至室溫

蒸餾水

700

700

混勻,520nm蒸餾水調(diào)零,測定各管吸光值,ΔA=A測定-A對照,每個測定管設(shè)一個對照管。

蔗糖酶活力計算:

1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 0.1296x -0.12;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml),y為吸光值。

2、按照蛋白濃度計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化水解1μg蔗糖定義為一個酶活力單位。

蔗糖酶活力(μg/min/mg prot)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(V1×Cpr)÷T=771×(ΔA +0.12)÷Cpr。

3、按樣本鮮重計算

單位定義:每g組織每分鐘催化水解1μg蔗糖定義為一個酶活力單位。

蔗糖酶活力(μg/min/g鮮重)=[1000×(ΔA+0.12)÷0.1296×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=771×(ΔA +0.12) ÷W。

10001mg/ml=1000μg/mlV1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.1ml;V2:加入提取液體積,1ml;T:反應(yīng)時間,10minCpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mlW:樣本鮮重,g

 

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