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土壤脲酶(S-UE)檢測(cè)試劑盒(微量法 100T/48S)

貨號(hào) SH0313 售價(jià)(元) 936
規(guī)格 100T/48S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0313

土壤脲酶(S-UE)檢測(cè)試劑盒(微量法 100T/48S)

100管/48樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

S-UE能夠水解尿素,產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和速效氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。

測(cè)定原理:

利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的NH3-N

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0313-100T/48S

Storage

試劑一:甲苯

2ml(自備)

4℃

試劑二:粉劑

1

-4℃

試劑三:液體

22ml

4℃

試劑A

1

4℃

試劑B

1

4℃

試劑五:液體

2ml

4℃

說明書

一份

 

試劑二:粉劑×1瓶,臨用前加入9ml蒸餾水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的試劑4℃保存;

試劑四A液:液體×1支,4℃保存;試劑四B液:液體×1瓶,4℃保存;臨用前將A液倒入B液中混合,待用;用不完的試劑4℃保存一周。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允許快遞)和蒸餾水。

樣品處理:

新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干,過30~50目篩。

測(cè)定步驟:

1 、培養(yǎng)

 

測(cè)定管

對(duì)照管

風(fēng)干土樣(g)

0.05

0.05

試劑一(μl

20

20

振蕩混勻,室溫放置15min

試劑二(μl

90

 

蒸餾水(μl

 

90

試劑三(μl

190

190

混勻,放入37℃水浴培養(yǎng)24h后,10000g 25℃離心10min,取上清液。

2、將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋10倍(取0.1ml上清液,加入0.9ml蒸餾水)。

3、測(cè)氨量(在微量石英比色皿或96孔板中加入下列試劑):

 

測(cè)定管

對(duì)照管

稀釋后的上清液(μl

80

80

試劑四(μl

15

15

試劑五(μl

15

15

充分混勻,室溫放置20min

蒸餾水(μl

90

90

混勻,于578nm處,蒸餾水調(diào)零,讀吸光值A,計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

脲酶活力計(jì)算

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.0915x +0.0373;x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/ml),y為吸光值A。

單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個(gè)酶活力單位。

脲酶活力(μg/d/g 土樣)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反總÷W÷T =656×(ΔA -0.0373)

10:稀釋倍數(shù);T:反應(yīng)時(shí)間,1d; V反總:反應(yīng)體系總體積:0.3ml;W:樣本質(zhì)量,0.05g。

b.96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為y = 0.04575x +0.0373x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度(μg/ml),y為吸光值A

單位的定義:每天每g土樣中產(chǎn)生1μg NH3-N定義為一個(gè)酶活力單位。

脲酶活力(μg/d /g 土樣)=(ΔA-0.0373) ÷0.04575×10×V反總÷W÷T =1312×(ΔA -0.0373)

10:稀釋倍數(shù);T:反應(yīng)時(shí)間,1d; V反總:反應(yīng)體系總體積:0.3mlW:樣本質(zhì)量,0.05g。

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