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土壤過氧化氫酶檢測(cè)試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號(hào) | SH0315 | 售價(jià)（元） | 1020 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0315 |
土壤過氧化氫酶（Solid-Catalase，S-CAT）試劑盒（微量法100T/48S） |
100管/48樣 |
測(cè)定意義：
S-CAT是土壤微生物代謝的重要酶類，在H2O2清除系統(tǒng)中具有重要作用。
測(cè)定原理：
H2O2在240nm下有特征吸收峰，通過測(cè)定與土壤反應(yīng)后溶液在此波長下吸光度的變化，即可反應(yīng)S-CAT活性的高低。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0315-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
300μl |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑三：液體 |
3ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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試劑一：液體300μl×1瓶，4℃保存；臨用前加入29.7ml蒸餾水充分溶解后待用；用不完的試劑4℃保存；
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入1ml蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存（如出現(xiàn)結(jié)晶析出，60℃-90℃水浴溶解后使用）。
自備儀器和用品：
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板（UV板）和蒸餾水。
樣品處理：
新鮮土樣自然風(fēng)干或37度烘箱風(fēng)干，過30~50目篩。
測(cè)定步驟：
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至240nm，蒸餾水調(diào)零。
2、測(cè)定前務(wù)必準(zhǔn)備96孔UV板一塊（UV板不是普通酶標(biāo)板，普通酶標(biāo)板只能透過可見光，不能透過紫外光，檢測(cè)波長小于340nm務(wù)必使用UV板）。
3、加樣表。
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試劑名稱 |
測(cè)定管 |
無基質(zhì)管 |
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風(fēng)干土樣（g） |
0.03 |
0.03 |
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試劑一（μl） |
260 |
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蒸餾水（μl） |
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260 |
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25℃振蕩培養(yǎng) 20min |
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試劑二（μl） |
10 |
10 |
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混勻8000g，25℃離心5min，取180uL上清 |
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試劑三（μl） |
20 |
20 |
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混勻， 240nm處記錄各管吸光值A。 |
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注意事項(xiàng)
每個(gè)測(cè)定管要設(shè)一個(gè)無基質(zhì)管，無土管只要做一管。
S-CAT活性計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
單位的定義：每天每g風(fēng)干土樣催化1μmol H2O2降解定義為一個(gè)酶活力單位。
計(jì)算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A無土管-A測(cè)定管+A無基質(zhì)管)×V反總÷（ε×d）×106]÷W÷T=16.5×（A無土管-A測(cè)定管+A無基質(zhì)管）
V反總：反應(yīng)體系總體積，3×10-4 L；ε：過氧化氫摩爾消光系數(shù)，4.36×104 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm； T：反應(yīng)時(shí)間，20 min=1/72d； W：樣本質(zhì)量，0.03g。
b.用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
單位的定義：每天每g風(fēng)干土樣催化1μmol H2O2降解定義為一個(gè)酶活力單位。
計(jì)算公式：S-CAT（μmol/d/g）＝[(A無土管-A測(cè)定管+A無基質(zhì)管)×V反總÷（ε×d）×106]÷W÷T=33×（A無土管－A測(cè)定管+A無基質(zhì)管）
V反總：反應(yīng)體系總體積，3×10-4 L；ε：過氧化氫摩爾消光系數(shù)，4.36×104 L / mol /cm；d：96孔板光徑，0.5cm； T：反應(yīng)時(shí)間，20 min=1/72d； W：樣品質(zhì)量，0.03g。