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土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)檢測(cè)試劑盒(50T/24S)

貨號(hào) SH0341 售價(jià)(元) 960
規(guī)格 50T/24S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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貨號(hào)

名稱(chēng)

規(guī)格

SH0341

土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)檢測(cè)試劑盒( 分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

S-LAP是一類(lèi)能水解肽鏈N-末端為亮氨酸的酶,由土壤微生物分泌。S-LAP活性變化與機(jī)體某些病理狀態(tài)密切相關(guān)。

測(cè)定原理:

S-LAP分解L-亮氨酰對(duì)硝基苯胺生成對(duì)硝基苯胺,后者在405nm有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算S-LAP活性。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱(chēng)

SH0341-50T/24S

Storage

試劑一:液體

65ml

4℃

試劑二:粉劑

1

-20

說(shuō)明書(shū)

一份

自備儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿和蒸餾水。

S-LAP測(cè)定步驟:

1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至405nm,蒸餾水調(diào)零。

2、在試劑二瓶中加入30ml試劑一充分溶解(如較難溶解,可60℃水浴加熱約30min促進(jìn)溶解);用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

3、操作表:

試劑名稱(chēng)

對(duì)照管

測(cè)定管

新鮮土樣(g

0.2

0.2

試劑一(μl

1200

 

試劑二(μl

 

1200

混勻, 37℃振蕩反應(yīng)1h后,8000g 4℃離心10min,取1ml上清液于比色皿中,405nm處測(cè)定吸光值A,計(jì)算ΔA=A測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

S-LAP活力單位的計(jì)算

用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

單位的定義:每天每g土樣每天生成1 μmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

S-LAPμmol/d /g 土樣)=ΔA×V反總÷ε×d×106÷W÷T=14.8×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,1.2×10-3 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cmT:反應(yīng)時(shí)間,1h=1/24dW:樣本質(zhì)量,0.2g