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土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶(S-C1)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

貨號 SH0343 售價(元) 840
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0343

土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶(S-C1)檢測試劑盒(分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定                                             

測定意義:

C1EC3.2.1.91)存在于細菌、真菌和動物體內(nèi),是纖維素酶系的組份之一,C1催化多聚糖鏈的末端非還原端釋放出纖維二糖和葡萄糖。

測定原理:

采用3,5-二硝基水楊酸法測定C1催化微晶纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。

試劑的組成和配制:

產(chǎn)品名稱

SH0343-50T/24S

Storage

提取液:液體

50ml

4℃

試劑一:液體

15ml

4℃

試劑二:液體

60ml

4℃

說明書

一份

自備儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、離心機、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

樣品測定的準備:

稱取約0.1g新鮮土樣或風干土樣,加入1ml提取液,進行冰浴勻漿,室溫振蕩提取30min,然后10000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、分光光度計預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至540nm,蒸餾水調(diào)零。

2、加樣表(在EP管中依次加入下列試劑)

試劑名稱(μl

測定管

對照管

  樣本

50

50

試劑一

500

 

蒸餾水

 

500

混勻,37℃準確水浴2h

試劑二

1000

1000

混勻, 90℃水浴10min(蓋緊,防止水分散失),冷卻后,540nm下吸光值A,計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設一個對照管。

S-C1活性計算

標準條件下測定回歸方程為y = 6.4078x - 0.0673;x為標準品濃度(mg/ml),y為吸光值。

單位的定義:每g土樣每分鐘催化產(chǎn)生1μg 葡萄糖定義為一個酶活力單位。

S-C1活力(μg /min /g鮮重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反總]÷(W× V÷V樣總) ÷T=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W

10001mg/ml=1000ug/ml;V反總:反應體系總體積,0.55ml; V樣:加入樣本體積,0.05 ml;V樣總:加入提取液體積,1 ml;T:反應時間,120 min;W:樣本質(zhì)量,g