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土壤脂肪酶（S-LPS）檢測(cè)試劑盒（微量法100T/96S）
| 貨號(hào) | SH0346 | 售價(jià)（元） | 900 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0346 |
土壤脂肪酶（S-LPS）檢測(cè)試劑盒（微量法100T/96S） |
100T/96S |
測(cè)定意義：
LPS又稱甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和單酯）。LPS廣泛的存在于各種生物中。
測(cè)定原理：
LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率，即可計(jì)算LPS活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0346-100T/96S |
Storage |
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試劑一：液體 |
65ml×2 |
4℃ |
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試劑二：液體 |
10ml |
4℃ |
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試劑三：甲苯 |
80ml（自備） |
4℃ |
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試劑四：液體 |
10ml |
4℃ |
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標(biāo)準(zhǔn)品：液體 |
10 μl |
4℃ |
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說(shuō)明書 |
一份 |
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試劑二：液體10ml×1瓶，4℃保存。每次使用前用震蕩混勻器劇烈震蕩20min。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體10 μl×1瓶，10 μmol/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，4℃保存。臨用前加入3.168 ml甲苯，充分溶解。
自備儀器和用品：
研缽、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、甲苯80ml、冰和蒸餾水。
樣本處理：
建議稱取約0.1g土樣，加入1ml試劑一進(jìn)行冰浴勻漿，再用回旋式振蕩器振蕩提取15min，4℃，4000g離心10min，取上清待測(cè)。
S-LPS測(cè)定操作：
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到710 nm，蒸餾水調(diào)零。
2、試劑一和試劑二置于37℃水浴預(yù)熱30min。
3、在1.5ml EP管中依次加入下列試劑；
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試劑名稱（μl） |
空白管 |
測(cè)定管 |
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蒸餾水 |
150 |
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樣本 |
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50 |
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試劑一 |
300 |
300 |
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試劑二 |
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100 |
37℃振蕩反應(yīng)10 min。
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試劑三 |
800 |
800 |
37℃振蕩反應(yīng)10 min后，8000g，25℃，離心10min，取上清液
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試劑名稱（μl） |
空白管 |
測(cè)定管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
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上清液 |
400 |
400 |
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標(biāo)準(zhǔn)品 |
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400 |
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試劑四 |
100 |
100 |
100 |
37℃振蕩反應(yīng)5 min后，靜置5min，取200μl上層液加入微量石英比色皿/96孔板，于710nm處測(cè)定吸光值。
注意事項(xiàng):
空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
S-LPS活性計(jì)算公式：
活性單位定義：37℃中每克土樣每分鐘水解橄欖油生成1μmol脂肪酸為一個(gè)酶活單位。
S-LPS (μmol/min/g 土樣) = [C標(biāo)準(zhǔn)品×(A測(cè)定管-A空白管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管）]×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T
=16×[(A測(cè)定管－A空白管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管）]÷W
C標(biāo)準(zhǔn)品：10 μmol/ml；V反總：反應(yīng)總體積，0.8ml；V樣：反應(yīng)中加入樣本體積，0.05ml；V樣總：加入提取液體積，1ml； W：樣本質(zhì)量，g；T：催化反應(yīng)時(shí)間，10 min。
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