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土壤羥胺還原酶（HR）檢測試劑盒（微量法100T/48S）
| 貨號 | SH0384 | 售價（元） | 1800 |
| 規(guī)格 | 100T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0384 |
土壤羥胺還原酶（HR）檢測試劑盒（微量法100T/48S） |
100T/48S |
測定意義：
土壤羥胺還原酶能將土壤中氮代謝過程中形成的中間產(chǎn)物羥胺還原為氨，土壤中的還原態(tài)化合物可作為氫的供體，其強弱影響到土壤氮代謝過程中氮素的氨揮發(fā)損失，間接影響氮肥的利用效率。
測定原理：
硫酸鐵銨中的Fe3+可將羥胺氧化為氮氣，自身被還原為Fe2+，Fe2+在弱酸條件下與鄰菲羅琳形成橙紅色配合物，在510nm處有吸收峰，羥胺還原酶作用于羥胺，使配合物形成量減少，510nm處吸光值的減少可反映羥胺還原酶的活性。
試劑組成和配制：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0384-100T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
4ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃ |
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試劑三：液體 |
12ml |
4℃ |
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試劑四：液體 |
8ml |
4℃ |
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試劑五：液體 |
4ml |
4℃ |
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試劑六：液體 |
2ml |
4℃避光 |
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試劑七：液體 |
2ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加4ml蒸餾水充分溶解。
自備儀器和用品：
天平、常溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、震蕩儀、氮吹儀。
樣品處理：
新鮮土樣自然風干或 37 度烘箱風干，過 30~50 目篩。
測定操作表：
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空白管 |
對照管 |
測定管 |
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風干土樣（g） |
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0.02 |
0.02 |
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試劑一（μl） |
40 |
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40 |
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蒸餾水（μl） |
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40 |
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試劑二（μl） |
40 |
40 |
40 |
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混勻后，用N2氣流排除管中空氣，立即密封，于30℃反應1h |
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試劑四（μl） |
80 |
80 |
80 |
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充分震蕩10min，8000rpm，25℃，離心10min |
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上清液（μl） |
20 |
20 |
20 |
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試劑五（μl） |
40 |
40 |
40 |
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試劑六（μl） |
20 |
20 |
20 |
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試劑七（μl） |
20 |
20 |
20 |
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蒸餾水（μl） |
100 |
100 |
100 |
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充分混勻，25℃靜置顯色10min，用蒸餾水調(diào)零，于微量石英比色皿/96孔板測定510nm各管吸光值，分別記為A空白管、A標準管、A對照管、A測定管，△A＝A空白管－（A測定管－A對照管）。 |
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計算公式：
a. 使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.185x -0.1828，R2 = 0.9992
酶活定義：每克土壤每天轉(zhuǎn)化1μg羥胺為一個酶活力單位。
HR活性（μg/d /g土樣）=（△A+ 0.1828）÷ 0.185×V反總÷W÷T
= 36.32×（△A+0.1828）÷W
b. 使用96孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 0.0925x -0.1828，R2 = 0.9992
酶活定義：每克土壤每天轉(zhuǎn)化1μg羥胺為一個酶活力單位。
HR活性（μg/d /g土樣）=（△A+ 0.1828）÷ 0.0925×V反總÷W÷T
=72.64×（△A+0.1828）÷W
V反總：加入提取液體積，0.28ml；W：樣本質(zhì)量，g；T：1/24h
注意事項：
1. 土壤表層溶解氧濃度較大，取樣應取表層5cm以下的土壤，否則酶活性較低或者測定不到。
2. 試劑三盡量不要敞口放置，取完立即加蓋擰緊。
3. 反應體系最好能用氮吹儀排除溶解氧，若無此裝置，則加入試劑三后立即密封，于30℃反應1h。