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土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)測定試劑盒(微量法100T/48S)

貨號 SH0400 售價(元) 936
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
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貨號

名稱

規(guī)格

SH0400

土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)測定試劑盒(微量法100T/48S)

100T/48S

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,ACX一般分離自耐酸的真菌,細(xì)菌及部分霉菌。

測定原理:

ACX在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,進(jìn)一步在沸水浴條件下與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計算ACX活力。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0400-100T/48S

Storage

緩沖液:液體

10ml

4℃

試劑一:液體

3ml

4℃避光

試劑二:液體

10ml

4℃避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

天平、常溫離心機(jī)、震蕩儀、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板

樣品處理:

新鮮土樣風(fēng)干,過30-50目篩。

測定操作表:

1、 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至540nm

2、 操作表

 

對照管

測定管

土樣(g

0.02

0.02

緩沖液(μl

150

100

試劑一(μl

 

50

混勻,50℃震蕩反應(yīng)30min,立即90℃水浴10min,8000g,25℃離心10min,取上清100μl

試劑二(μl

100

100

混勻,90水浴中顯色5min,取180μl于微量石英比色皿/96孔板測定540nm處吸光值A,分別記為A對照管、A測定管,A=A測定管-A對照管。

S-ACX計算公式:

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 2.5554x - 0.002 ,R2 = 0.9983

酶活定義:50℃pH4.8條件下,每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生1μmol 還原糖所需的酶量為一個酶活單位。

S-ACX活力(μmol/d/g土樣)= △A+0.002÷ 2.5554 ×V反總×103÷ W÷T÷ 150

                        =18.78 ×△A+0.002÷ W

V反總:反應(yīng)總體積,0.15ml;T:反應(yīng)時間,1/48d;10001mmol/L =103μmol/L150:木糖分子量。

b.96孔板測定的計算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 1.2777x - 0.002 ,R2 = 0.9983

酶活定義:50℃,pH4.8條件下,每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生1μmol 還原糖所需的酶量為一個酶活單位。

S-ACX活力(μmol/d/g土樣)=△A+0.002÷1.2777×V反總×103÷ W÷T÷ 150

                        = 37.56 ×△A+0.002÷ W

V反總:反應(yīng)總體積,0.15mlT:反應(yīng)時間,1/48d;10001mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。

注意事項:

1. 保證震蕩反應(yīng)30min,使酶與底物充分接觸。

2. 注意90℃水浴防止爆開,以免改變反應(yīng)體系。

 

 

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