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甘油三酯(TG)含量測(cè)定試劑盒(分光光度法50T/48S)

貨號(hào) SH0468 售價(jià)(元) 600
規(guī)格 50T/48S CAS號(hào)
  • 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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貨號(hào)

名稱

規(guī)格

SH0468

甘油三酯(TG)含量測(cè)定試劑盒(分光光度法50T/48S)

50管/48樣

正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義:

TG是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細(xì)胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。

測(cè)定原理:

用異丙醇提取TG,脂蛋白酯酶水解TG生成甘油和脂肪酸(FFA),甘油與三磷酸腺苷在甘油激酶和磷酸甘油氧化酶催化下生成H2O2,過氧化物酶催化過氧化氫氧化4-氨基安替比林偶聯(lián)酚,生成有色化合物,在505 nm處有特征吸收峰。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0468-50T/48S

Storage

試劑一:液體

60 ml

4℃

試劑二:液體

26 ml

4℃

試劑三:液體

26 ml

    4℃避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水

TG的提?。?/span>

1、 組織中TG的提?。?/span>按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即TG待測(cè)液。

2、細(xì)胞、細(xì)菌中TG的提?。?/span>先收集400-500萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),離心后棄上清,1ml試劑一,超聲波破碎1min(強(qiáng)度20%,超聲2s,停1s,8000g4℃離心10min,取上清,即TG待測(cè)液。

3、血清(漿)樣品:直接測(cè)定。

測(cè)定操作:

可見分光光度計(jì)預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到505 nm。

試劑(μl

空白管

測(cè)定管

樣本

 

50

試劑一

50

 

試劑二

475

475

試劑三

475

475

混勻,室溫下靜置20min,于505 nm波長處讀取吸光值,記為A空白和A測(cè)定,△A=A測(cè)定-A空白??瞻坠苤恍铚y(cè)一管。

計(jì)算公式:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.6522x - 0.0199 R2 = 0.9979;x標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/ml y:吸光值差值ΔA

1. 血清(漿)中甘油三酯含量計(jì)算:

TG含量(mg/ml=ΔA+0.0199÷0.6522=1.533×ΔA+0.0199

2. 組織、細(xì)菌或細(xì)胞中甘油三酯含量計(jì)算:

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

TG含量(mg/ mg prot= (ΔA+0.0199)÷0.6522×V÷(Cpr×V樣)=1.533×ΔA+0.0199÷Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算

TG含量(mg/ g 鮮重=ΔA+0.0199÷0.6522×V÷(W×V÷V樣總)=1.533×ΔA+0.0199÷ W

V樣:加入樣本體積,0.01 ml;V樣總:加入試劑一體積,1 ml;W:樣本質(zhì)量,g;

Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml

注意事項(xiàng):

1. 試劑盒中有易揮發(fā)性物質(zhì),實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩,試劑瓶蓋打開后應(yīng)該及時(shí)蓋緊。

2. 最低檢出限為100μg/ml

 

 

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