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維生素B6（VB6）檢測試劑盒(分光光度法50T/48S)
| 貨號 | SH0597 | 售價(jià)（元） | 660 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0597 |
維生素B6（VB6）檢測試劑盒(分光光度法50T/48S) |
50管/48樣 |
測定意義：
維生素B6（Vitamin B6）又稱吡哆素，其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺，在體內(nèi)以磷酸酯的形式存在，是一種水溶性維生素，在細(xì)胞中參與多種蛋白質(zhì)和氨基酸的代謝，對生物體具有極其重要的作用。
測定原理：
VB6與4-氨基安替比林在強(qiáng)氧化劑作用下生成穩(wěn)定的黃色化合物，在390nm有特征吸收峰。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0597-50T/48S |
Storage |
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提取液：液體 |
35ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
1ml |
4℃ |
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試劑二：液體 |
12ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
18ml |
4℃避光 |
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試劑四：液體 |
18ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、1 ml玻璃比色皿、蒸餾水。
樣本處理：
1. 組織：將樣品磨碎，按照質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入0.6ml提取液）加入提取液，60℃浸提30min，加蒸餾水0.4ml，混勻后于25℃，16000rpm離心10min，取上清測定（動(dòng)物組織等蛋白含量較高的樣本建議離心20-30分鐘）。
2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入0.6ml提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；加蒸餾水0.4ml，混勻后于25℃，16000rpm離心10min，取上清測定。
3. 血清：直接測定。
測定操作：
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空白管 |
測定管 |
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樣品（μl） |
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200 |
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試劑一（μl） |
200 |
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試劑二（μl） |
200 |
200 |
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試劑三（μl） |
300 |
300 |
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試劑四（μl） |
300 |
300 |
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充分混勻，25℃反應(yīng)20min，于1ml玻璃比色皿，蒸餾水調(diào)零，測定390nm處吸光值，記為A空白管和A測定管，△A=A測定管-A空白管?？瞻坠苤灰鲆还?。 |
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計(jì)算公式：
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 0.3635x+0.0205，R2 = 0.9986
1. 按照蛋白含量計(jì)算
VB6含量（μg/mg prot）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷（V樣×Cpr）
= 13.76×（△A - 0.0205）÷ Cpr
2. 按照樣本質(zhì)量計(jì)算
VB6含量（μg/g）=（△A - 0.0205）÷ 0.36359 ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）
= 13.76×（△A - 0.0205）÷ W
3. 按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
VB6含量（μg/104 cell）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷（V樣×細(xì)胞數(shù)量÷V樣總）
= 13.76×（△A - 0.0205）÷ 細(xì)胞數(shù)量
4. 按照液體體積計(jì)算
VB6含量（μg/ml）=（△A - 0.0205）÷ 0.3635×V反總÷V樣
=13.76×（△A - 0.0205）
V反總：反應(yīng)總體積，1ml；：V樣：加入樣本體積，0.2ml；V樣總：加入提取液體積，1ml； Cpr：蛋白濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g
注意事項(xiàng)：
1. 若測定結(jié)果中吸光值超過1，請將樣本稀釋后進(jìn)行測定，并在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
2. 蛋白濃度較高的樣品，比如動(dòng)物組織，若顯色完成后有沉淀產(chǎn)生，將樣本稀釋后再測定，在計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
3. 顯色完成后立即進(jìn)行測定。