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Bambanker HRM無血清干細(xì)胞ES/iPS細(xì)胞凍存液
貨號 | BBH01 | 售價(元) | 1203 |
規(guī)格 | 20ml | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
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冷凍保存哺乳動物細(xì)胞在生物學(xué)研究中非常有價值和普遍。為了防止技術(shù)原因(培養(yǎng)操作)使細(xì)胞污染或物理原因(培養(yǎng)箱故障)使長期培養(yǎng)功虧一簣。此外,長期多次的培養(yǎng)和傳代,導(dǎo)致細(xì)胞在遺傳學(xué)性狀上的老化和分化都是促使在接收或生成新細(xì)胞系后首要考慮的最佳策略就是凍存細(xì)胞。低溫凍存對于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0℃到-20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),冰晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。
如何減少或者避免冰晶形成,如同凍存細(xì)菌時用的甘油,DMSO(二甲基亞砜)是一種滲透性保護(hù)劑,能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn),減少冰晶的形成,減輕自由基對細(xì)胞損害,改變生物膜對電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。凍存液中加入后可以使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)的水分逐漸透出,從而減少了冰晶的形成,從而避免細(xì)胞的損傷。這就是為什么低溫凍存細(xì)胞時為什么要采用慢凍的一個重要原因。
一旦從生長培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到冷凍培養(yǎng)基中,就要執(zhí)行慢凍的過程。盡管冷凍細(xì)胞系是通常執(zhí)行的程序,但是當(dāng)沒有合適的冷凍器具時,或者由于存在血清,額外洗滌或操作不當(dāng)時,就會出現(xiàn)問題。當(dāng)然,這個問題是在細(xì)胞復(fù)蘇(快融)后才發(fā)現(xiàn)的。發(fā)現(xiàn)復(fù)蘇后的細(xì)胞大部分或者全部都是死細(xì)胞,甚至還有不容易發(fā)現(xiàn)的整個凍存過程的不當(dāng)導(dǎo)致的細(xì)胞分化。所有這些問題和擔(dān)憂,都可以通過BambankerTM細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基試劑家族來解決。 BambankerTM獨(dú)特的成分允許直接將細(xì)胞在-80°C或液氮中冷凍保存,從而避免了對額外設(shè)備的需求,并且也避免了耗時且復(fù)雜的梯度逐漸冷凍方案。
產(chǎn)品特色
• 可在-80°C或-196°C的溫度下長期凍存細(xì)胞
• 冷凍保存ES細(xì)胞和iPS細(xì)胞的理想選擇
• 用人血清白蛋白制成-無其他動物成分
• 細(xì)胞復(fù)蘇后的活率高
• 即用型冷凍介質(zhì)–無需程序或順序降溫冷凍
• 無血清–無污染風(fēng)險
• 保質(zhì)期長
冷凍保存ES和iPS細(xì)胞的新希望(A new hope for the cryopreservation of ES and iPS cells)
靈長類胚胎干細(xì)胞(ES)和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS)對冷凍保存極為敏感,與鼠類或其他細(xì)胞相比,冷凍保存存在許多困難。 目前,玻璃化方法被認(rèn)為適用于靈長類ES / iPS細(xì)胞,盡管使用DMSO的慢速冷凍方法已廣泛用于多種細(xì)胞系。 玻璃化是指將冷凍介質(zhì)快速冷卻至玻璃狀結(jié)晶狀態(tài)。 玻璃化方法需要無懈可擊的時機(jī),高水平的技能,并且仍然會產(chǎn)生較差的結(jié)果。 另外,該方法顯示出對干冰運(yùn)輸?shù)拿舾行浴?為了解決這些問題,Nippon Genetics已經(jīng)開發(fā)了新的冷凍培養(yǎng)基BambankerTM HRM。
將人iPSC 201B7細(xì)胞冷凍保存在BambankerTM HRM中,常規(guī)玻璃化培養(yǎng)基或10%DMSO /培養(yǎng)基中。 3天后,根據(jù)Protocol將細(xì)胞解凍,然后鋪板。 含有10%DMSO的培養(yǎng)基只能回收小菌落,這表明存活率較低,而使用BambankerTM HRM可以回收幾乎與玻璃化冷凍保存液相同大小的大菌落。 這些結(jié)果表明,使用BambankerTM HRM可以達(dá)到與玻璃化保存解決方案相同的存儲效率,并且具有易于處理的額外優(yōu)勢。
人iPS細(xì)胞冷凍保存效率的比較。數(shù)據(jù)由美國公司日本東京研究中心Hasumi國際研究基金會提供。
比較了BambankerTMHRM和其他兩凍存工業(yè)(供應(yīng)商T,供應(yīng)商S)對于普通絨猴成纖維細(xì)胞的儲藏效率。 將成纖維細(xì)胞在6 cm培養(yǎng)皿中培養(yǎng),直至融合度達(dá)到90-100%。 將細(xì)胞在-80℃冷凍兩個月。每種保存溶液在融化后分別在24和48 h拍攝顯微照片。 確定死細(xì)胞的百分比。 BambankerTM HRM的存活率最高,其次是供應(yīng)商T的凍存液, 供應(yīng)商S的凍存液有最低的存活率。 僅使用BambankerTM HRM儲存的細(xì)胞顯示出足夠的數(shù)量,因此可以直接用于iPS細(xì)胞誘導(dǎo)。
數(shù)據(jù)由京都大學(xué)靈長類研究所,分子生理學(xué)研究部提供
血清增加了長期儲存的差異(Serum adds variation to long-term storage)
所有BambankerTM產(chǎn)品均不含血清。含有血清的冷凍保存培養(yǎng)基具有回收率波動和成分不確定的缺點(diǎn)。凍存于含血清的培養(yǎng)基中的細(xì)胞的實驗可重復(fù)性可能會受到批次之間血清差異的影響,因為蛋白質(zhì)和其他生物分子的組成和濃度會隨每批血清而變化。解凍和使用這種含血清培養(yǎng)基的細(xì)胞時,可能會導(dǎo)致問題。因為BambankerTM的每種成分都經(jīng)過精確定義,因此您可以放心,在不同時間存儲的細(xì)胞都將有一致的效率。
BambankerTM可防止不期望的分化(BambankerTM prevents undesired differentiation)
不期望的細(xì)胞分化也可能是冷凍細(xì)胞長期保存的一個問題。 所有Bambanker試劑均旨在最大程度地減少此問題。 對于特別麻煩的細(xì)胞,Bambanker不含DMSO的配方經(jīng)過特殊配制,可防止可能與含DMSO的冷凍保存試劑相關(guān)的問題。 因此,請加入越來越多的實驗室的選擇,使用Bambanker保護(hù)其細(xì)胞系!
多能干細(xì)胞的細(xì)胞活力和ALP染色
上排:解凍兩天后檢測到大量細(xì)胞。 解凍后細(xì)胞沒有形態(tài)變化
下排:BambankerTM不會引起細(xì)胞分化,因為所有凍結(jié)的干細(xì)胞仍會產(chǎn)生高水平的堿性磷酸酶,這是多能干細(xì)胞的報告基因
細(xì)胞凍存液家族(Family of BambankerTM)