當(dāng)前位置： 首頁 - 新聞中心 - 專業(yè)知識(shí)
鬼筆環(huán)肽（phalloidin 鬼筆鵝膏素）
——細(xì)胞骨架的染色神器
鬼筆環(huán)肽是從毒蕈類鬼筆鵝膏（Amanita phalloides）中得到的有毒環(huán)狀七肽，它的作用與細(xì)胞松弛素Ｂ恰好相反, 只與聚合的微絲結(jié)合, 而不與肌動(dòng)蛋白單體分子結(jié)合。鬼筆環(huán)肽通過與聚合的微絲結(jié)合， 抑制了微絲的解體, 破壞了微絲的聚合和解聚的動(dòng)態(tài)平衡。用FITC和Rhodamin等熒光物質(zhì)標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可特異的與真核細(xì)胞的F-actin結(jié)合，從而顯示微絲骨架在細(xì)胞中的分布。
warbio生物提供多款不同熒光基團(tuán)標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽，可以滿足您多標(biāo)實(shí)驗(yàn)的不同需。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
（1）親和力高：Kd= 20 nM；
（2）特異性強(qiáng)：選擇性結(jié)合于絲狀肌動(dòng)蛋白F-actin，而不會(huì)與單體肌動(dòng)蛋白G-actin結(jié)合；
（2）優(yōu)于抗體染色：鬼筆環(huán)肽無物種限制，且?guī)缀醪淮嬖诜翘禺愋匀旧旧珔^(qū)和非染色區(qū)域?qū)Ρ刃詷O其明顯；
（4）靈敏度高：納摩爾濃度（nM）染色即可滿足實(shí)驗(yàn)要求；
（5）兼容性好，肌動(dòng)蛋白活力不受影響：鬼筆環(huán)肽衍生物很小，直徑約12-15?，分子量＜2000 Da，標(biāo)記后的肌動(dòng)蛋白許多生理特性都得以維持；
（6）適用范圍廣：無物種差異性；同樣適用于甲醛固定和打孔處理后的組織樣本。
實(shí)驗(yàn)流程：
鬼筆環(huán)肽的配制：
0.1mg鬼筆環(huán)肽溶于1ml無水甲醇（也可用DMSO或無水乙醇溶解）配成貯存液，可在-20度避光的條件下長(zhǎng)期保存，工作液的濃度為5ug/ml，由貯存液加生理鹽水PBS稀釋20倍即可。
染色程序：
生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次，每次10分鐘；3.7%-4%的甲醛或多聚甲醛固定20分鐘，生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次；加入5ug/ml的FITC-鬼筆環(huán)肽室溫染色30-60分鐘，夏季時(shí)間可以短一些，生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次；DAPI或hoechst33258染細(xì)胞核10分鐘，生理鹽水PBS清洗細(xì)胞2次；吸去多余水分，加熒光封片液（中性或偏堿性緩沖液加等量甘油），蓋上蓋玻片，熒光或共聚焦顯微鏡下觀察。
染色結(jié)果：
相關(guān)產(chǎn)品：
|
貨號(hào) |
產(chǎn)品 |
規(guī)格 |
單價(jià)/元 |
|
LX1801 |
iFluor? 488 phalloidin iFluor? 488標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（綠色） |
300T |
1857 |
|
LX2801 |
iFluor? 555 phalloidin iFluor? 555標(biāo)記鬼筆環(huán)肽（橘色） |
300T |
1857 |
|
LX3032 |
LysoTracker Green DND-26 溶酶體綠色熒光探針 |
50μl |
428 |
|
LX4032 |
LysoTracker Red DND-99 溶酶體紅色熒光探針 |
50μl |
428 |
|
LX5242 |
MitoTracker? Red CM-H2XRos線粒體紅色熒光探針 |
50μg |
428 |
|
LX6252 |
MitoTracker? Red CMXRos 線粒體紅色熒光探針 |
50μg |
428 |
|
LX7262 |
MitoTracker? Green FM 線粒體綠色熒光探針 |
50μg |
428 |
|
LX8272 |
MitoTracker? Deep Red FM 線粒體遠(yuǎn)紅色熒光探針 |
50μg |
428 |
|
J705S3 |
JC-1 線粒體膜電位熒光探針 |
1mg |
768 |
|
J705S8 |
JC-1 線粒體膜電位熒光探針 |
5mg |
2858 |