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正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義：

銅藍(lán)蛋白是血漿的含銅蛋白，有運(yùn)輸銅的功能，同時(shí)具有氧化酶的活性，是細(xì)胞外液重要的抗氧化劑。

測(cè)定原理：

銅藍(lán)蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍(lán)色產(chǎn)物，在645nm處有特征吸收峰，依此可得銅藍(lán)蛋白活性。

組成：

試劑三：液體20ml×1瓶，4℃避光保存。（使用前37℃預(yù)熱）

自備儀器和用品：

天平、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 ml玻璃比色皿和蒸餾水。

測(cè)定操作表

1、 血清（漿）等液體樣本：直接檢測(cè)。

2、 動(dòng)植物組織樣本：稱取約0.1g組織，加入1ml蒸餾水，進(jìn)行冰浴勻漿。10000g ，4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

計(jì)算公式

1、 按體積計(jì)算

單位定義：37℃條件下，每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個(gè)酶活單位。

Cp活力（U/ml）=×V反總÷V樣÷T=33.33×OD₆₄₅

2、 按鮮重計(jì)算

單位定義：37℃條件下，每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個(gè)酶活單位。

Cp活力（U/g鮮重）=×V反總÷（W×V樣÷V樣總）÷T=33.33×OD₆₄₅÷W

3、 按蛋白濃度計(jì)算

單位定義：37℃條件下，每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個(gè)酶活單位。

Cp活力（U/mg prot）=×V反總÷（Cpr×V樣）÷T=33.33×OD₆₄₅÷Cpr

V樣：0.1 ml；V反總：1 ml；T：反應(yīng)時(shí)間，30min；V樣總：加入提取液體積，1ml； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本質(zhì)量，g

注意事項(xiàng)

試劑二和試劑三有一定的毒性和刺激性，請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施。