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銅藍(lán)蛋白(Cp)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

貨號 SH0056 售價(jià)(元) 408
規(guī)格 100T/48S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0056

銅藍(lán)蛋白(Cp)檢測試劑盒(微量法100T/48S)

100T/48S

正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

銅藍(lán)蛋白是血漿的含銅蛋白,有運(yùn)輸銅的功能,同時(shí)具有氧化酶的活性,是細(xì)胞外液重要的抗氧化劑。

測定原理:

銅藍(lán)蛋白催化3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯胺生成藍(lán)色產(chǎn)物,在645nm處有特征吸收峰,依此可得銅藍(lán)蛋白活性。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0056-100T/48S

Storage

試劑一:液體

10ml

4℃

試劑液體

7ml

4℃

試劑液體

15ml

4℃避光

說明書

一份

試劑三:液體15ml×1瓶,4避光保存。(使用前37預(yù)熱)

自備儀器和用品:

天平、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

測定操作表

1、 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至645nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 操作表

 

空白管

測定管

樣品(μl

30

30

試劑一(μl

90

90

試劑二(μl

60

 

混勻,37預(yù)熱5min

試劑三(μl

120

120

混勻,37反應(yīng)30min

試劑二(μl

 

60

混勻,25室溫放置5min,取200μl于微量石英比色皿/96孔板中,測定645nm處吸光值。

ΔA=A測定-A空白。

計(jì)算公式:

a. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

1、 按體積計(jì)算

酶活定義:37條件下, 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高0.01為一個(gè)酶活單位。

Cp活力U/ml=ΔA×V反÷0.01÷V÷T = 33.33×ΔA

2、 按鮮重計(jì)算

單位定義:37℃條件下,每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個(gè)酶活單位。

Cp活力U/g鮮重=ΔA×V反÷0.01÷W×V÷V樣總)÷T = 33.33×ΔA÷W

3、 按蛋白濃度計(jì)算

單位定義:37℃條件下,每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.01為一個(gè)酶活單位。

Cp活力U/ mg prot=ΔA×V反÷0.01÷(Cpr×V樣)÷T = 33.33×ΔA÷Cpr

 

V樣:0.03 ml;V反總:0.3 ml;T:反應(yīng)時(shí)間,30min;V樣總:加入提取液體積,1ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣質(zhì)量,g

b. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

1、 按體積計(jì)算

酶活定義:37條件下, 每分鐘每毫升樣品與底物作用吸光度升高0.005為一個(gè)酶活單位。

Cp活力U/ml=ΔA×V反÷0.005÷V÷T = 66.66×ΔA

2、 按鮮重計(jì)算

單位定義:37℃條件下,每分鐘每克樣品與底物作用吸光值升高0.005為一個(gè)酶活單位。

Cp活力U/g鮮重=ΔA×V反÷0.005÷W×V÷V樣總)÷T = 66.66×ΔA÷W

3、 按蛋白濃度計(jì)算

單位定義:37℃條件下,每分鐘每毫克蛋白樣品與底物作用吸光值升高0.005為一個(gè)酶活單位。

Cp活力U/ mg prot=ΔA×V反÷0.005÷(Cpr×V樣)÷T = 66.66×ΔA÷Cpr

V樣:0.03 ml;V反總:0.3 mlT:反應(yīng)時(shí)間,30minV樣總:加入提取液體積,1ml; Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣質(zhì)量,g

 

注意事項(xiàng):

試劑二和試劑三有一定的毒性和刺激性,請操作時(shí)做好防護(hù)措施。

 

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