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蔗糖磷酸合成酶(SPS)檢測試劑盒(可見分光光度法50T/24S)

貨號 SH0302 售價(元) 900
規(guī)格 50T/24S CAS號
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

貨號

名稱

規(guī)格

SH0302

蔗糖磷酸合成酶(SPS)檢測試劑盒(可見分光光度法50T/24S)

50管/24樣

正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定                                             

測定意義:

蔗糖不僅是重要的光合產(chǎn)物,也是植物體內(nèi)運輸?shù)闹饕镔|(zhì),還是碳水化合物的貯存形式之一。SPSEC 2.4.1.14)以果糖-6-磷酸為受體,形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系統(tǒng)看作是蔗糖合成的主要途徑。

測定原理:

蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸,蔗糖磷酸與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。

組成:

產(chǎn)品名稱

SH0302-50T/24S

Storage

提取液:液體

60ml

4℃

試劑一:液體

4ml

-20℃

試劑二:1000μg/ml蔗糖溶液

10ml

4℃

試劑三:液體

3ml

-20℃

試劑四:液體

40ml

4℃

試劑五:液體

12ml

4℃避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水

樣品測定的準備:

按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

試劑名稱(μl

測定管

對照管

標準管

空白管

樣本

30

30

 

 

蒸餾水

 

150

150

180

試劑二

 

 

30

 

試劑一

150

 

 

 

混勻,25℃準確水浴10min

 試劑三

50

50

50

50

沸水浴中煮沸10min左右(蓋緊,以防止水分散失),冷卻

 試劑四

     700

     700

700

700

試劑五

     200

     200

200

200

混勻,沸水浴30min,冷卻后, 480nm下測定各管吸光值。標準管和空白管只要做一管。每個測定管需要設(shè)一個對照管。

SPS活力單位的計算:

1、按照蛋白濃度計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。

SPS活性(μg /min/mg prot)= C標準管×V1×A測定管-A對照管A標準管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×A測定管-A對照管A標準管-A空白管)÷Cpr

2、按照樣本鮮重計算

單位定義:每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。

SPS活性(μg /min /g鮮重) =  C標準管×V1×A測定管-A對照管A標準管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×A測定管-A對照管A標準管-A空白管)÷W 

C標準管:標準管濃度,1000μg/ml;V1:加入反應(yīng)體系中樣本體積,0.03ml; V2:加入提取液體積,1ml;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/ml;W:樣本鮮重,g;:反應(yīng)時間:10min。

 

 

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